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城市湿地公园不同含水量的土壤中,细菌等微生物含量会有什么差异?本试验以念坛公园(北京市大兴区新城滨河森林公园北园区)为例,经过对公园内湿地不一样的区域的土样进行恰当采样、处理、科学测定,以探求其间细菌等微生物数量的差异。
琼脂、氯化钠、酵母浸出粉、蛋白胨(dòng)、蒸馏水、涂布器、封口膜、酒精灯、锥形瓶、皮筋、一次性无菌培育皿、移液枪及枪头
别离对念坛公园接近水域的土壤及远离水域的土壤进行采样。因为绝大多数细菌等微生物散布在距地表3~8厘米深的土壤层中,因而,在取样时要适度铲去表层土。
1.制备土壤样液两种土壤样品别离称取10克,置于90毫升无菌水(经灭菌处理后的蒸馏水)中,充沛摇匀,得到土壤样液,别离标记为“远”“近”。
2.对土壤样液进行梯度稀释将土壤样液静置,汲取100微升的上清液置于900微升的无菌水中,取得10倍稀释的土壤样品稀释液。从该稀释液中取100微升,再置于900微升的无菌水中,取得1x102倍稀释的土壤样品稀释液。随后过程以此类推,得到1x104、1x105和1x106倍稀释的土壤样品稀释液(这些浓度的稀释液菌落较为客观,且易计数)。
1.制备培育基并灭菌制造培育基:蛋白胨(蛋白质可溶性水解产品的通称,是培育基的常用氮源)10克、酵母提取物5克、氯化钠10克、琼脂粉15~20克、蒸馏水适量(不超越1000毫升)。将该混合物加热,溶化成通明状况,定容至1000毫升,分装进不同的锥形瓶中。将锥形瓶包上封口膜,用皮筋勒紧,再放入高压蒸汽灭菌锅中,与两个300毫升空的锥形瓶、300毫升蒸馏水等一同在压力100千帕、温度121摄氏度的条件下灭菌15~30分钟。
2.倒平板并涂布接种(在超净工作台内操作)待培育基冷却至不棘手时,在将培育基倒至一次性无菌培育皿中。别离汲取100微升的1x104、1x105和1x106倍稀释的土壤样品稀释液,置于培育皿中,用涂布器涂布均匀。
注:涂布器应浸泡于酒精中,运用前需将其放在火焰上灼烧,待酒精燃尽、冷却后,用涂布器将菌液涂均匀。
3.培育将现已接种好细菌等微生物的培育基倒置(避免水滴落入平板引起杂菌污染)于30~37摄氏度的培育箱内培育1~2天,观测试验成果,过程中请勿翻开。因菌种成长速度有差异,也可在室内守时追寻观测成果。
别离在第2天、第3天、第4天进行调查,发现接近水域的土壤中细菌等微生物的品种和数量远高于远离水域的土壤。土壤中细菌等微生物的数量巨大,其品种与数量受多种要素的影响。
间隔水域较近的当地,有水分含量较高、养分的东西较为丰厚、氧气的分散相对较慢、气温改变较为平缓等特色,这一切要素都愈加有助于微生物的成长。
咱们对微生物“繁华都市”的探究之旅并未完毕,在此留下两个思考问题供我们深化探求:一、不同时节替换轮转,土壤中的细菌等微生物又会出现怎样不同的面貌?是春日复苏的繁荣,仍是冬日蛰伏的安静?二、除了文中提及的要素,还会有哪些奥秘力气在影响着微生物们的“日子”?是未曾留心的土壤酸碱度,仍是奇妙的动植物共生联系?期望这样一些问题能如星星之火,点着我们持续探究的热心。
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